无。
简介:测定血浆蛋白的水平和分析其成分是肝脏疾病重要试验之一。有关这方面的测定在别外章节中已有详尽讨论,本节中主要叙述一些和蛋白质代谢有关的简单血清胶体稳定试验。各种血清胶体稳定性试验的原理基本相同,但所用的试剂不同,促进和抑制絮浊的作用有差异,目前临床常用的有TTT试验。
无。
TTT是一个很简单的试验,但各试验室间出入往往不小。造成此差异因素很多;首先是虽然同称为TTT试验,但各个实验室在试剂配制,标准曲线绘制或标准管配制方法上并不相同。
(1)国内所报告的TTT单位为Shank(襄克)单位。1944年Maclagen(麦克莱根)首先建立TTT试验,当时以Kingsley(金斯莱)尿蛋白比浊管表示TTT浊度单位(相当于10mg/dl尿蛋白溶液加磺柳酸所显示的浊度为一个Maclagan单位)。后来,Shank和Hoagland改用BaSO4悬液作为浊度标准,由0.0962mol/LBaCl2加H2SO4所产生的浊度相当于Maclagan所应用的Kingsley标准。但在发表文章
时,误印为0.0962NBaCl2,因此测定结果为麦氏单位的二倍(1个麦氏单位=2个Shank单位)。
(2)血清要新鲜,应早晨空腹抽血。用分光光度计比浊法测定麝浊时,如血内脂质较多,可用生理盐水6ml代替缓冲液稀释血清,作空白管。
(3)麝香草酚-巴比妥缓冲液的pH应在7.50~7.60。pH增高,敏感度降低,可出现假阴性;pH降低,敏感度升高,可出现假阳性。
(4)为了简化手续,不少实验室用100g/L麝香草酚乙醇溶液,直接加入巴比妥缓冲液中,省去结晶和过滤步骤,但此配方较原法多含1%乙醇,试验结果表明比原配方的浊度偏离约20%,絮状试验阳性率反而降低。
(5)麝香草酚浊度试验结果随温度的改变而有所变化。一般是温度高,浊度低;温度低,浊度高。为了克服这一误差,可以从表1上将不同温度下的浊度结果换算成25℃的结果以便于比较。
使用说明:以6u一行为例,在10℃时测定的6u,实际上在25℃时为4.7u。在30℃时测定的6u,在25℃时为7.2u。余类推。
(6)配制硫酸钡标准比浊管时注意以下几点:①硫酸试剂的浓度硫酸在反应中虽然是过量的,但当浓度小于0.1mol/L,形成的硫酸钡浊度低;浓度大于0.1mol/L浊度增高。因此,硫酸试剂须严格校正至0.1mol/L。②反应温度:10℃时形成的硫酸钡颗粒细,浊度较高,结果重复性好。25℃、30℃、37℃时形成的颗粒较粗,浊度较低,重复性不易控制。③操作手法:混和方法不同,形成的硫酸钡颗粒大小不同,结果相差很大。所以,每次按规定操作可提高精密度。
(7)麝香草酚缓冲液易变质,但如保存于冰箱中,可因结晶逐渐析出而降低敏感度,故平时使用时,仍应置室温中,如显混浊,即不能用。
(8)麝香草酚应为洁白晶体,如带黄色,须重结晶处理。可按下法重结晶精制:取麝香草酚100g,溶于100ml95%乙醇中,以吸滤漏斗过滤。滤液中加入于100ml冷蒸馏水,混匀。静置20min后吸滤,用冷蒸馏水洗结晶两次,可得到洁白的结晶,置干燥器内待完全干燥后使用。
(9)用巴比妥配制的试剂不能久置,超过2周后,TTT结果有增高趋势,一个月后明显偏高。一般认为此试剂不稳定与巴比妥有关,因为久置后,巴比妥试剂的红外线吸收曲线已有明显变化。本文所介绍麝香草酚-Tris-HCl缓冲液,具有稳定性高,所配TTT试剂放室温至少可保存3个月,且浊度结果受室温变化的影响小。
(10)光电比浊法与光电比色法有所不同,比浊法混浊液除了吸收一部分入射光以外,悬浮的颗粒还能使一部分入射光反射和折射,因此光电池所感受的光除了经过吸收以后的出射光外,还有折射的光,后者不是平行光束,混和液和光电池之间距离越大,则折射光的影响越小。所以在采用72型分光光度计比浊时,比色杯的位置应放在比色杯座的远光电池的一边,可以提高准确度。
(11)麝香草酚缓冲液中麝香草酚含量是影响结果的重要因素之一。浊度单位高低和麝香草酚含量成正比,要求使用25℃的麝香草酚饱和溶液。
缓冲液中麝香草酚含量测定法:麝香草酚标准液(1ml含0.1mg):准确称取试剂规格麝香草酚100mg,加水溶解后加水至1L。
取待测麝香草酚缓冲液1ml,用水稀释至10ml,以后按表2进行测定。
混匀37℃水浴放置15min,750nm比色,以空白管校正吸光度至零,读取各管吸光度,按下式计算:
北京协和医院是集医疗、教学、科研于一体的现代化综合三级甲等医院,是国家卫生健康委指定的全国疑难重症诊治指导中心,最早承
锦江春色来天地,玉垒浮云变古今。在中国历史文化名城成都市锦江万里桥头的华西坝,有一座闻名遐迩的医学城,她就是四川大学华
一、历史沿革中国人民解放军总医院前身是中国协和医学院第二临床学院,1953年10月,总后方勤务部卫生部决定将“中
复旦大学附属中山医院是国家卫生健康委员会委属事业单位,是复旦大学附属综合性教学医院。医院开业于1937年,是中国人创建和
瑞金医院建于1907年,原名广慈医院,是一所集医疗、教学、科研为一体的三级甲等综合性医院,有着百年的深厚底蕴。医院占地
功能主治:清肝胆,利湿热。用于肝胆湿热,头晕目赤,耳鸣耳聋,胁痛口苦,尿赤,湿热带下。
功能主治:疏肝理气,健脾消食。具有降低转氨酶作用。用于慢性肝炎及早期肝硬化等。
功能主治:本品适用于消化不良、食欲不振、营养不良,肠道菌群紊乱引起的腹泻、便秘、腹胀、肠道内异常发酵、肠炎,使用抗生素引起的肠粘膜损伤等症。
功能主治:清热,祛湿,利胆。用于肝胆湿热所致的胁痛、口苦;急性胆囊炎、胆管炎见上述证候者。